解剖学报

作者：戴迦勒,刘盈君,邵晓梅,方剑乔,方芳

单位：浙江中医药大学第三临床医学院，浙江省针灸神经病学重点实验室，杭州 310053

关键词：神经痛, 焦虑样行为, 外周单核细胞, 海马CA3区, 免疫荧光, 小鼠 

基金：浙江省自然科学基金;国家自然科学基金项目;浙江省医药卫生科技计划

目的： 观察不同时间点神经痛小鼠海马CA3区外周单核细胞的浸润，阐述这一现象对小鼠神经痛及焦虑样行为的影响。 方法： 采用健康雄性C57小鼠，将小鼠随机分为假手术组（sham）、坐骨神经分支选择性损伤（SNI）模型组（SNI）、CCR2抑制剂RS102895处理组（SNI+RS102895）和小胶质细胞活化抑制剂米诺环素（MC）处理组（SNI+MC），共4组。其中假手术组和模型组均进一步分为7 d 、14 d 和18 d 组，SNI+RS102895和SNI+ MC 组均在第18天时取材。手术诱发神经痛，采用机械缩足阈（PWTs）测定不同时点痛阈，所有小鼠处死前2 d进行高架十字迷宫(EPM)实验，处死前1 d进行旷场实验(OFT)观察焦虑样行为变化。免疫荧光法检测小鼠海马CA3脑区白细胞分化抗原45（CD45）的表达及与小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子1（IBA-1）、跨膜蛋白119（TMEM119），星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元标记物神经元核抗原（NeuN）的共表达，流式细胞术检测14 d SNI小鼠全脑单核细胞的百分比。18 d 小鼠 SNI 后第5~16天分别灌胃给予MC 90 mg/（kg·d)、RS102895 5 mg/（kg·d）与生理盐水，观察阻断单核细胞浸润对小鼠神经痛、焦虑样行为及海马CA3区CD45及IBA-1的表达的影响。 结果： 7 d和14 d组小鼠SNI 后1 d PWTs下降，持续到处死前（P<0.01）。假手术组CD45表达极少；与同时段假手术组比较，7 d SNI 小鼠CD45表达无增加（P&gt;0.05），14 d SNI小鼠CD45表达显著上升（P<0.01），且只与IBA1和TMEM119有少量共表达，与GFAP、NeuN无共表达。14 d SNI小鼠全脑单核细胞百分比显著上升（P<0.01）。抑制小胶质细胞激活与抑制CCR2表达均能减少SNI小鼠CA3区CD45的表达（P<0.01），且能提高SNI小鼠机械痛阈（P<0.01）并缓解焦虑样行为（P<0.01）。 结论： SNI诱发神经痛14 d后小鼠海马CA3区有外周单核细胞的浸润，该现象可能参与了神经痛的维持及促进焦虑样行为的发生。：

来源：2024年第6期

《解剖学报》期刊编辑部

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