解剖学报

作者：李娜,李涛,姚媛,李静,庄乾宇

单位：1.陕西中医药大学基础医学院第二临床医学院，陕西 咸阳 712046; 2.中国医学科学院基础医学研究所北京协和 医学院基础学院组织工程中心，北京 100005; 3.中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院骨科，北京 100730

关键词：微小RNA-181b-5p, Sprouty 4, 骨髓间充质干细胞, 成骨分化, 实时定量聚合酶链反应, 人 

基金：四神丸通过调节骨代谢平衡防治慢性胰腺炎性骨质疏松症

目的： 进一步探讨微小RNA(miR)-181b-5p抑制人骨髓间充质干细胞（BMMSCs）成骨分化的调控机制。 方法： 取5名健康成人骨髓，分离培养和鉴定人BMMSCs。通过生物信息学网站预测、双荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blotting实验，探究miR-181b-5p与Sprouty4(SPRY4)蛋白的靶向关系。将BMMSCs分为3组：miR-181b-5p过表达阴性对照组；miR-181b-5p过表达组；miR-181b-5p过表达+SPRY4沉默组。碱性磷酸酶（ALP）染色和ALP活性分析法鉴定早期成骨分化效果；茜素红染色检测钙结节沉积情况；Real-time PCR和Western blotting检测成骨分化标志基因的mRNA和蛋白表达水平。 结果： 成功分离并鉴定BMMSCs；miR-181b-5p与SPRY4基因mRNA的3’UTR特异性结合，过表达miR-181b-5p后，SPRY4蛋白水平表达显著下调，但在mRNA水平无明显改变，敲降SPRY4解除内源性miR-181b-5p减少对BMMSCs成骨分化的促进作用。 结论： MiR-181b-5p通过下调SPRY4蛋白抑制BMMSCs成骨分化。：

来源：2024年第6期

《解剖学报》期刊编辑部

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