国内刊号:11-2228/R
国际刊号:0529-1356
发布日期:
作者:王建美,金卫东,刘振,刘烝昊
单位:新乡市中心医院心血管内科,河南 新乡 453000
关键词:微小RNA-145, 血小板活化, 外泌体, 血管内皮功能, 冠状动脉粥样硬化性心脏病, 实时定量聚合酶链反应, 免疫印迹法, 大鼠
基金:河南省医科技攻关计划项目
目的 探讨外泌体(Exo)传递微小RNA(miR-145对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAHD,简称冠心病)模型大鼠血小板活化以及血管内皮功能的影响及分析。 方法: 通过Real-time PCR检测miR-阴性对照(NC)和miR-145转染HEK239细胞的效果,并转染从转染miRNA-NC、miRNA-145的HEK239细胞中分离的Exo,透射电子显微镜下观察Exo形态并分析其径粒分布情况,Western blotting测定CD81、热休克蛋白70(HSP70)及肿瘤易感基因101(TSG101)蛋白表达;实验分为对照组、模型组、miR-NC Exo组、miR-145 Exo组,每组8只大鼠,处理结束后,动物超声诊断仪测定大鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)、左心室舒张末期内径(LVIDD)、左心室收缩末期内径(LVIDS),HE染色观察大鼠心肌组织与主动脉组织的病理改变,ELISA测定大鼠血清血小板活化因子(PAF)、β血小板球蛋白(β-TG)、血小板膜糖蛋白Ⅱa/Ⅲb(GPⅡa/Ⅲb)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量,免疫组织化学染色检测大鼠主动脉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。 结果: 转染miR-145的HEK239细胞中miR-145相对表达量显著高于未转染及转染miR-NC的HEK239细胞(P <0.05),分离的颗粒物呈典型的杯状或盘状囊泡,直径大多分布在100 nm,CD81、HSP70及TSG101蛋白均高表达,且转染miR-NC的Exo中miR-145相对表达量显著低于转染miR-145的 Exo(P <0.05)。与miR-NC Exo组比较,miR-145 Exo组大鼠EF、FS显著升高(P <0.05),LVIDD、LVIDS显著减小(P <0.05),心肌组织与主动脉组织病理变化改善效果更好,血清中PAF、β-TG、GPⅡa/Ⅲb、ET-1和VEGF含量显著降低(P <0.05),NO含量也显著升高(P <0.05),主动脉组织eNOS 阳性表达率也显著增加(P <0.05)。 结论 Exo传递miR-145能够抑制冠心病模型大鼠血小板活化,改善血管内皮功能,对冠心病模型大鼠起到保护作用。:
来源:2024年第6期
《解剖学报》期刊编辑部