解剖学报

作者：宫川惠,邱家怡,印可馨,张继茹,何铖,袁野,吕广明

单位：1.南通大学医学院人体解剖学系，江苏 南通 226001; 2.南通大学医学院2019级临床医学五年制，江苏 南通 226001;3.南通大学神经生物学研究所，江苏省神经再生重点实验室，江苏 南通 226001

关键词：组织透明化, 光学透明, 清晰无障碍脑成像鸡尾酒和计算分析, 亲水性组织透明化技术, 小鼠

基金：江苏省研究生科研与实践创新计划项目

目的 为了缩短清晰无障碍脑成像鸡尾酒和计算分析（CUBIC）技术的透明时间，提高透明效率，探索亲水性组织透明技术应用的可能性，本研究对CUBIC技术进行灌注优化后，与4种亲水性透明化方法在组织透明效果、透明时间、面积变化、体积变化及腺相关病毒(AAV)荧光保留情况等方面进行了比较。 方法 取6只成年美国癌症研究所（ICR）小鼠的脑、肝、脾和肾分别采用SeeDB、FRUIT、ScaleS、CUBIC的方法进行透明化处理，使用Image J 1.8.0 测算样本的面积和灰度值，排水法测量透明前后体积，比较各组的透明效果、时间以及大小变形。通过改进灌注速率与最佳灌注剂量对CUBIC技术进行灌注优化，每组实验样本量为6。另在16只成年小鼠的大脑运动皮层定位注射AAV，4周后取其颈髓节段透明化处理，荧光照片经过ImageJ1.8.0测量平均荧光强度，评估不同技术的荧光保存情况。 结果 灌注CUBIC的最佳灌注速率和灌注剂量分别是15 ml/min和200 ml。对于透明能力和速度，灌注CUBIC技术的平均灰度值最低且用时最短，而CUBIC消耗的时间最长，SeeDB、FRUIT、ScaleS并没有显示出良好的透明能力。在面积和体积变化方面，几种技术对组织或器官透明后均有不同程度的膨胀。在荧光保留方面，灌注CUBIC对绿色荧光蛋白(GFP)荧光信号的保留效果最好，其次是 CUBIC、ScaleS、FRUIT和 SeeDB。 结论 灌注CUBIC技术与其他技术相比，组织透明效果最好，透明时间最短，AAV荧光保留最多。

来源：2024年第3期

《解剖学报》期刊编辑部

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