解剖学报

作者：郝经伟,潘婷,李月,朱文斌,段文博,刘立琨,岳丽玲,刘云龙,高秀丽

单位：1.齐齐哈尔医学院医学技术学院; 2.药学院; 3.医药科学研究院，肿瘤分子生物学研究室，黑龙江 齐齐哈尔 161006; 4.齐齐哈尔医学院附属第二医院肿瘤外科，黑龙江 齐齐哈尔 161006

关键词：乳腺癌, 核仁磷蛋白乙酰化, 定点突变, 蛋白质组学, 人

基金：黑龙江省自然科学基金项目;黑龙江省博士后面上项目;国家自然科学基金项目;黑龙江省教育厅面上项目;黑龙江省省属本科高校中央支持地方高校改革发展资金项目;黑龙江省教育厅项目;齐齐哈尔医学院研究生创新基金项目;齐齐哈尔医学科学院临床科研基金项目

目的 明确女性乳腺癌中核仁磷蛋白（NPM）乙酰化修饰水平，并通过修饰位点突变体的构建探讨其功能。：：方法 蛋白质修饰组学方法检测对比人乳腺癌组织及癌旁正常组织（各3例）NPM乙酰化水平及乙酰化位点；基因定点突变PCR构建NPM乙酰化突变体，限制性内切酶(DpnI)消化及大肠埃希菌转化获得特异性突变体重组质粒；双酶切与测序验证各突变体序列准确性；瞬时转染及RT-PCR方法检测各突变体过表达效果。Western blotting验证NPM乙酰化水平，蛋白质定量组学及生物信息学分析NPM乙酰化功能。：：结果 乳腺癌组织样本中NPM第27及第32位赖氨酸乙酰化水平分别为癌旁正常组织的2.76及2.22倍；构建的NPM乙酰化位点突变体与野生型NPM分子量一致且出现预期突变位点；转染NPM各突变体的BT-549细胞相应NPM mRNA表达水平明显升高。随着野生型NPM表达水平增加，蛋白乙酰化水平增加，27位赖氨酸发生负向突变后，修饰水平下降。NPM乙酰化可使BT-549细胞中101种蛋白表达水平发生明显变化，上述蛋白在细胞大分子生物合成，以DNA为模板的转录过程，RNA生物合成以及RNA代谢过程中富集。：：结论 乳腺癌NPM呈高乙酰化水平并可能在细胞大分子生物合成，转录过程，RNA生物合成以及RNA代谢过程中发挥关键功能。

来源：2024年第2期

《解剖学报》期刊编辑部

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