国内刊号:11-2228/R
国际刊号:0529-1356
发布日期:
作者:谢惠兰,方芳,林毅
单位:1.福建省立医院口腔科; 2.福建医科大学省立临床医学院,福州 350000
关键词:牙髓干细胞, 成骨诱导分化, Chir99021, 实时定量聚合酶链反应, 大鼠
基金:福建省科技技术项目
目的: 探讨Chir99021对大鼠牙髓干细胞(DPSCs)成骨诱导分化的影响及机制。:: 方法: 原代分离大鼠DPSCs,利用荧光免疫法进行验证。设置不同浓度的Chir99021,通过CCK-8检测细胞增殖情况挑选最适浓度。利用茜素红染色验证细胞成骨诱导分化。最后通过Real-time PCR、Western blotting检测成骨诱导分化相关基因与蛋白无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、无翅型MMTV 整合位点家族成员3A(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、 轴抑制蛋白2抗体(Axin2)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的mRNA和蛋白表达情况。: 结果: 牙本质涎磷蛋白(DSPP)和干细胞标记物波形蛋白(vimentin)阳性表达,说明大鼠DPSCs分离成功。大鼠DPSCs成骨诱导后钙沉积物显著上升,加入糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的小分子抑制剂Chir99021后钙沉积物明显减少。大鼠DPSCs成骨诱导分化后Wnt1、Wnt3a、β-catenin、Axin2、OCN和DMP1表达明显上升,而加入Chir99021后Wnt1、Wnt3a、β-catenin、Axin2、OCN和DMP1蛋白表达均显著下降。:: 结论: Chir99021对诱导7 d后的大鼠DPSCs成骨诱导分化有一定的抑制作用。
来源:2024年第1期
《解剖学报》期刊编辑部