解剖学报

作者：苏芃,王兴仪,梁景岩,熊天庆

单位：1.扬州大学医学院转化医学研究院，江苏 扬州 225001; 2.江苏省中西医结合老年病防治重点实验室，江苏 扬州 225001

关键词： 海马神经元,原代培养,低密度,免疫荧光,大鼠

基金：江苏省研究生科研与实践创新计划项目

目的 通过将海马、皮层细胞共培养的方式建立一种低密度、高纯度、高稳定性的大鼠胎鼠原代海马神经元体外培养方法，以获取纯度更高、活力更好的原代海马神经元。： ：方法： 分离孕16～18d SD大鼠胎鼠的海马和皮层并分别剪碎，经0.125%胰蛋白酶消化后用200目细胞筛过滤，将获得的细胞悬液以包围的形式分别接种于培养板的内层和外环上，于含10%马血清的DMEM/F12培养基中进行共同培养，4～6 h细胞贴壁后更换培养基为维持培养基培养（Neurobasal培养基+2% B27+0.5 mmol/L谷氨酰胺）。通过CCK-8试剂盒检测细胞活力，利用免疫荧光染色检测海马神经元纯度。：：结果： 海马神经元在5 d后形成纵横交错的神经网络，生长状态较好，经鉴定海马神经元的纯度高达98%，且能够稳定存活3周。： ：结论： 利用海马、皮层细胞共培养的方法可以获取高纯度、高活性、高存活率、高稳定性的胎鼠原代海马神经元，可为神经系统中海马神经元相关疾病研究提供一定的实验条件。

来源：2024年第1期

《解剖学报》期刊编辑部

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