解剖学报

国内刊号:11-2228/R

国际刊号:0529-1356

解剖学报杂志2023年第5期: 红细胞膜相关蛋白通过IL-6/STAT3/ROR-γt 信号通路抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中Th17细胞分化

发布日期:

作者:何可可,李远迪,文廷浩,朱婕,高杰,胡蓉,韩锋,苏敏

单位:1.贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,贵阳 550025; 2.贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室,贵州省再生医学重点实验室,中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室,贵阳 550025; 3.贵州医科大学转化医学研究中心,贵阳 550025; 4.贵州医科大学附属医院神经外科,贵阳 550004

关键词:红细胞膜相关蛋白, 实验性自身免疫性脑脊髓炎, 辅助性T细胞17, 白细胞介素-6, 信号转录及转录激活因子3, 维甲酸受体相关孤核受体γt, 流式细胞术, 小鼠

基金:国家自然科学基金;国家自然科学基金;贵州省科技支撑计划;贵州省科技支撑计划;贵州省卫健委科技基金

目的: 探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中,外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响。: :方法 流式细胞术验证不同浓度ERMAP-Ig融合蛋白功能;琼脂糖凝胶电泳鉴定ERMAP基因敲除小鼠。流式细胞术检测ERMAP-Ig融合蛋白在体外对Th17细胞分化影响。40只6周龄普通C57BL/6小鼠随机分为2组建立EAE模型:对照(control-Ig和ERMAP-Ig组,每组20只;记录临床评分;流式细胞术检测EAE小鼠体内Th17细胞分化情况。40只6周龄已鉴定的野生型和ERMAP基因敲除小鼠分为2组建立EAE模型:ERMAP+/+和ERMAP-/-组,每组20只。记录临床评分;脊髓HE和固蓝(LFB)染色并进行组织学半定量评分。流式细胞术检测IL-17A+CD4+ T细胞百分比;Western blotting检测IL-6、白细胞介素17(IL-17)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、ROR-γt蛋白水平表达;Real-time PCR检测IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、STAT3和ROR-γt的mRNA表达;ELISA检测细胞水平IL-17和TNF-α的表达。: :结果: 1.外源性ERMAP-Ig融合蛋白抑制体内外Th17细胞分化且减轻小鼠EAE症状。2.与对照组相比,ERMAP-/-组EAE小鼠炎性浸润和脱髓鞘症状加重,Th17分泌IL-17A增加。3.内源性ERMAP基因敲除后,IL-17、TNF-α、IL-6、STAT3及ROR-γt表达均增加。差异均有统计学意义(P<0.05)。:结论: ERMAP可能通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路调控Th17细胞分化,参与小鼠EAE发生发展。

来源:2023年第5期

《解剖学报》期刊编辑部

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