解剖学报

作者：谢秋敏,孙艳婷,许皓,刘蕙文,易勤,谭彬,田杰,朱静

单位：1.重庆医科大学附属儿童医院儿研所，国家儿童健康与疾病临床医学研究中心，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室，重庆400014; 2.重庆医科大学附属儿童医院检验科，重庆400014; 3.重庆医科大学附属儿童医院心血管科（内科），重庆400014

关键词：低氧低糖血清剥夺, 氧化应激, 骨髓间充质干细胞, 免疫印迹法, 大鼠

基金：Islet-1 诱导MSCs特化心肌细胞的电生理构建与能量代谢重塑调控

目的 探讨低氧低糖血清剥夺（GSDH）处理对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）氧化应激及凋亡的影响。： 方法 在体外对提取纯化后的原代BMSCs利用低氧（1% O2）、低糖（1.0g/L）及血清剥夺联合处理建立BMSCs细胞损伤模型。采用集落形成实验、细胞周期测定以及CCK-8实验检测细胞增殖能力；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力；通过细胞凋亡试剂（AnnexinV-FITC/PI）、线粒体膜电位检测试剂（JC-1）染色和线粒体荧光探针（Mito-Trancker）检测细胞凋亡；细胞活性氧簇（ROS）和钙离子（Fluo-4AM）检测细胞氧化应激水平；Western blotting检测抗氧化应激相关分子谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）等以及核因子红细胞系2相关因子2（Nrf2）信号通路中关键分子的蛋白表达水平。： 结果 大鼠原代BMSCs表面标志物高表达CD29、CD71，低表达CD45、CD34；GSDH处理抑制BMSCs细胞增殖（P<0.05）和迁移（P<0.05），增加ROS和钙离子水平（P<0.05），且抑制抗氧化应激相关分子GPX4等蛋白表达（P<0.01）；与空白对照组相比，GSDH处理后BMSCs凋亡显著升高（P<0.05）， 线粒体膜电位降低（P<0.01），网络化减少（P<0.01）。Nrf2信号通路中Nrf2蛋白及下游关键分子的蛋白表达水平均降低（P<0.05）。： 结论 GSDH处理诱发的BMSCs氧化应激及进一步导致的凋亡损伤与Nrf2信号通路被抑制有关。

来源：2023年第3期

《解剖学报》期刊编辑部

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