国内刊号:11-2228/R
国际刊号:0529-1356
发布日期:
作者:李光,李杰,张平
单位:1.天津医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系, 天津 300070; 2.卫生部激素与发育重点实验室, 天津市代谢性疾病重点实验室, 天津 300070; 3.天津市脊柱脊髓重点实验室, 天津 300052
关键词:骨形成, 成骨分化, 矿化, 微小RNA-30d-5p, 实时定量聚合酶链反应
基金:天津市教委科研计划项目
目的: 探讨微小RNA(miR)-30d-5p对骨髓基质细胞成骨分化和凋亡的影响及其作用机制。:: 方法: 将骨髓基质细胞分为miR-30d-5p过表达阴性对照组、miR-30d-5p过表达组、miR-30d-5p抑制阴性对照组和miR-30d-5p抑制组。碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨效果,茜素红染色检测钙结节沉淀情况,TUNEL检测凋亡水平。Real-time PCR、Western blotting检测mRNA和蛋白表达水平,生物信息学分析网站Targetscan 7.1预测miR-30d-5p的潜在结合位点。:: 结果: MiR-30d-5p过表达后,细胞成骨分化能力和矿化能力均降低(P< 0.05),而细胞凋亡水平升高(P<0.05)。葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和成骨特异性Runt相关转录因子2(RUNX2)蛋白表达均显著降低(P<0.05)。但是,miR-30d-5p抑制剂处理细胞后,细胞成骨分化能力和矿化能力均有提升(P<0.05),细胞凋亡水平降低(P<0.05)。GRP78和RUNX2蛋白水平均升高(P<0.05)。MiR-30d-5p结合位点位于GRP78基因3’UTR的142~148 bp 处。:: 结论: MiR-30d-5p通过下调GRP78蛋白的表达抑制骨髓基质细胞成骨分化,并且促进细胞凋亡。:
来源:2023年第2期
《解剖学报》期刊编辑部