解剖学报

作者：张雅群,付丽,任译延,乔妍梓,赵冬梅

单位：滨州医学院人体解剖学教研室，山东 烟台 264003

关键词：脂肪间充质干细胞, 分离, 培养, 诱导分化, 少突胶质前体细胞, 神经脱髓鞘疾病, 流式细胞术, 大鼠

基金：山东省重点研发计划项目;山东省医药卫生科技发展计划项目

目的： 改良酶消化法提取脂肪间充质干细胞(ADSCs)，并探讨诱导其分化为少突胶质前体细胞(OPCs)的可行性，为脱髓鞘疾病治疗种子细胞来源提供有效途径。：： 方法： 取SD大鼠腹股沟区脂肪，Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离培养ADSCs，Ⅰ型胶原酶组作为对照，细胞计数，观察细胞形态。取第3代细胞，流式细胞术检测细胞的表面标志物CD29、CD90和CD45；成脂诱导，油红O染色；利用干细胞分化培养液及OPCs培养液将ADSCs诱导为OPCs，免疫荧光检测α-N-乙酰基神经氨酸 α-2、8-唾液酸转移酶1（A2B5）、NG2；利用OPCs培养液继续培养OPCs分化为少突胶质细胞(OLs)。：： 结果 Ⅰ型胶原酶组分离的ADSCs为（9.143±0.5084）×107/L，联合酶组为（13.43±0.4809）×107/L，联合酶组较Ⅰ型胶原酶组ADSCs数量多，差异有统计学意义（P＜0.05，n=7）；细胞形态观察显示，ADSCs贴壁生长，呈长梭形；流式细胞术检测CD29 阳性率为99.8%，CD90阳性率为 99.4%，CD45 阳性率为0.35%；成脂诱导后倒置光学显微镜下可见脂滴，油红O染色脂滴呈红染；ADSCs向OPCs诱导第16天，A2B5和NG2表达阳性，A2B5阳性率为（87.03±0.94）%，NG2阳性率为（90.07±0.96）%;继续培养OPCs 3 d， 其分化为OLs，髓鞘碱性蛋白（MBP）表达阳性。：： 结论： 联合酶消化较单独胶原酶消化获取的细胞数量多，分离培养的细胞符合ADSCs的特征，体外可诱导分化为OPCs。

来源：2022年第5期

《解剖学报》期刊编辑部

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