解剖学报

作者：何昀,王银光

单位：1.重庆医科大学附属儿童医院胃肠新生儿外科，国家儿童健康与疾病临床医学研究中心，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室，重庆 400014;2.重庆市中医院肛肠科，重庆 400021

关键词：全反式维A酸, 骨形态发生蛋白9, 肝祖细胞, 高碘酸-希夫染色, 吲哚菁绿摄取, 小鼠

基金：重庆市科委基础研究与前沿探索项目

目的： 探讨全反式维A酸（ATRA）对骨形态发生蛋白9（BMP9）诱导肝祖细胞（HPCs）成熟分化的作用。：： 方法： BMP9、BMP9+1 μmol/L ATRA及BMP9+10 μmol/L ATRA分别作用于肝祖细胞14-19（HP14-19），荧光素酶报告基因检测清蛋白启动的荧光素酶（ALB-Glus）表达情况，Real-time PCR检测肝脏相关基因ALB、细胞角蛋白18（CK18）、酪氨酸转氨酶（TAT）、载脂蛋白B（ApoB ）的mRNA表达水平，免疫荧光检测Alb、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A（UGT1A）的表达、高磺酸-希夫（PAS）染色和吲哚菁绿（ICG）摄取实验检测肝细胞的代谢及糖原合成功能，Real-time PCR及Western blotting检测维A酸（RA）信号通路相关分子维A酸受体（RAR）α、RARβ、RARγ及 BMP9信号相关分子Samd1、Samd5、Samd8的表达。Ad-siRARα、Ad-siRARβ、Ad-siRARγ感染细胞，BMP9+10μmol/L ATRA处理，观察细胞形态及PAS染色结果，检测ALB、CK18、TAT、ApoB的mRNA水平表达。： 结果： BMP9可显著诱导HP14-19的成熟分化，细胞形态呈现多角形铺路石样，Alb、CK18、ApoB及UGT1A表达显著上调，部分细胞具有代谢解毒及糖原合成功能。BMP9+1 μmol/L ATRA处理后，细胞形态更加成熟，体积增大，ALB、CK18、ApoB及UGT1A表达较BMP9组显著上调（P＜0.05），ICG和PAS染色阳性细胞数增多，与之相比，BMP9+10 μmol/L ATRA的细胞呈现长梭形、纺锤形及多角形等多种形态，肝细胞相关标志表达降低，ICG和PAS染色阳性细胞数减少。1 μmol/L ATRA显著增高RARα、RARβ、RARγ的表达，10 μmol/L ATRA组较1 μmol/L ATRA组仅RARα表达增高，BMP9不影响Samd1、Samd5、Samd8的表达水平，但上调其磷酸化。Ad-siRARα可改善10 μmol/L ATRA诱导的细胞形态及PAS染色，Alb、CK18的表达显著上调（P＜0.05）。：： 结论： 1 μmol/L ATRA可促进BMP9诱导的肝祖细胞成熟分化，10 μmol/L ATRA会导致细胞分化减弱，过量ATRA可能过度激活RARα信号，影响肝祖细胞分化。

来源：2022年第5期

《解剖学报》期刊编辑部

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