解剖学报

作者：姜浩,谢卓君,张昊东,周红,罗庆,康权

单位：1.重庆医科大学附属儿童医院普通外科创伤外科，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，国家儿童健康与疾病临床医学研究中心，儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地，儿科学重庆市重点实验室，重庆 400014; 2.重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所，重庆 400014

关键词：无翅型MMTV整合位点家族成员5b, 胎肝干细胞, 慢性肝损伤, 肝纤维化, 实时定量聚合酶链反应, 小鼠

基金：重庆市自然科学基金面上项目

目的： 探讨重组腺病毒介导的无翅型MMTV整合位点家族成员5b(Wnt5b）基因过表达对小鼠胚胎肝干细胞分化的影响及对小鼠慢性肝损伤的修复作用。： 方法： 将表达Wnt5b和绿色荧光蛋白(GFP) 的重组腺病毒，分别感染小鼠胚胎肝干细胞HP14-19，诱导其分化，采用Real-time PCR、Western blotting验证Wnt5b的表达，吲哚菁绿（ICG）摄取实验、高碘酸-希夫（PAS）染色检测HP14-19成肝分化能力，Real-time PCR检测肝细胞标志物白蛋白(Alb) 和细胞角蛋白18(CK18)的表达；以48只雄性BALB/c小鼠为实验对象，随机分为对照组、模型组、干细胞治疗组及Wnt5b修饰的干细胞治疗组，采用CCl4建立慢性肝损伤模型，干细胞治疗2周后取材，进行肝脏病理染色及免疫组织化学评估肝脏修复情况。：： 结果： Real-time PCR及Western blotting检测均显示，Wnt5b在HP14-19中成功过表达（P<0.001）；Real-time PCR检测Wnt5b组细胞Alb、CK18的mRNA表达较GFP组及对照组均升高（P<0.001）； ICG摄取实验、PAS染色提示，诱导7 d后Wnt5b组细胞ICG摄取能力及糖原合成能力均较GFP组显著增强（P<0.01）；肝脏HE染色表明，模型组肝损伤明显，肝脏组织结构紊乱，干细胞组肝脏组织结构部分恢复，Wnt5b组肝组织恢复优于干细胞组；Masson染色显示，模型组有明显的纤维增生，Wnt5b组蓝染纤维较干细胞组更少（P<0.05）；免疫组织化学显示Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）、髓过氧化物酶（MPO）的表达在模型组明显升高，上述指标在Wnt5b组的表达水平较胎肝干细胞治疗组显著（P<0.05）。：： 结论： Wnt5b可诱导小鼠胎肝干细胞向成熟肝细胞样细胞分化，且此基因修饰的胎肝干细胞对慢性肝损伤小鼠肝脏的修复作用较胚胎肝干细胞更有优势。

来源：2022年第4期

《解剖学报》期刊编辑部

查看解剖学报杂志2022年第4期