国内刊号:11-2228/R
国际刊号:0529-1356
发布日期:
作者:张文琦,杨洁,吴江,郎贯存,效梅
单位:广东海洋大学滨海农业学院动物医学系,广东 湛江 524088
关键词:胰腺导管干细胞, 全反式维A酸, 胰岛, 实时定量聚合酶链反应, 大鼠
基金:广东省自然科学基金;教育部留学基金;国家级大学生创新创业训练计划项目
目的 对大鼠胰腺导管干细胞(rPDSCs)分化形成类胰岛的诱导方法进行改良。: 方法 在基础培养液DMEM/F12+10% FBS +1%青霉素/1%链霉素中,分别添加2、4、6和8 μmol/L全反式维A酸(ATRA),体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选ATRA最适诱导浓度。以ATRA最适诱导浓度为基础,再分别采用基质胶(matrigel)培养,悬浮培养或悬滴培养方式体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选最适诱导培养方式。采用细胞形态学,双硫腙(DTZ)染色,细胞免疫荧光染色,Real-time PCR和ELISA方法对诱导类胰岛进行检测。: 结果 与对照组相比,在基础培养液中,添加6 μmol/L ATRA及采用基质胶培养方式诱导效果最好。诱导28 d,细胞富集分化形成胰岛样球形细胞团;DTZ染色呈阳性;在基因和蛋白水平上分别表达胰岛素(insulin)和胰腺十二指肠同源框1(Pdx1);葡萄糖刺激,释放胰岛素和C肽,且具有葡萄糖浓度依赖性。: 结论 在基质胶培养方式下,采用6 μmol/L ATRA+DMEM/F12+10% FBS+1%青霉素/1%链霉素可以成功诱导rPDSCs体外分化形成类胰岛。
来源:2022年第3期
《解剖学报》期刊编辑部