国内刊号:11-2228/R
国际刊号:0529-1356
发布日期:
作者:叶鑫,边维,李梦一,吴安婷,张庭,李军伟,周鹏,崔怀瑞,孙臣友
单位:1.温州医科大学基础医学院解剖学教研室; 2.神经科学研究所; 3.基础医学院,浙江 温州 325035
关键词:CD133阳性室管膜细胞, Notch信号通路, 免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白, 免疫荧光, 小鼠
基金:别孕烯醇酮促进PD小鼠多巴胺能神经元新生的作用及 机制研究;激活 mTORC2/Akt 信号通路在改善 6-羟基多巴胺模型小鼠多巴胺能神 经元数目和行为学缺陷中的作用及 机制研究
目的 探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白(RBP-Jκ)对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。: 方法 分离孕12 d的美国癌症研究所(ICR)胚胎小鼠(3只)侧脑室室管膜细胞进行原代培养,并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选用2~3月龄体重为20~25 g的CD133-CreERTM::ROSA26-LacZ::RBP-Jκflox/flox小鼠(3只),通过腹腔注射他莫昔芬(TAM)敲除RBP-Jκ,通过免疫荧光双标染色检测CD133阳性室管膜细胞的增殖和分化变化的情况,最后通过Real-time PCR、Western blotting检测RBP-Jκ及其上下游相关分子表达情况。: 结果 干扰或敲除RBP-Jκ后,无论是细胞还是动物水平CD133或β-半乳糖苷酶(β-GAL)/双肾上腺皮质激素(DCX)/β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)、CD133或β-GAL/微管相关蛋白2(MAP-2)或神经元核抗原(NeuN)、CD133或β-GAL/增殖细胞核抗原(PCNA)双阳性细胞数目均明显增加。同时Real-time PCR和Western blotting结果表明,在干扰或敲除RBP-Jκ后RBP-Jκ-和Splity多毛增强子1(Hes1)mRNA及蛋白表达量均显著下降,而Notch1 mRNA及蛋白的表达量反而显著增加。: 结论 干扰或敲除RBP-Jκ,通过Notch1表达上调、Hes1表达下调,最终引起CD133阳性室管膜细胞的增殖与分化增加。
来源:2022年第2期
《解剖学报》期刊编辑部