解剖学报

作者：张樱馨,俞晓丽,罗晓强,邱意开,裴秀英

单位：1. 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，生殖与遗传重点实验室，银川 750004; 2. 宁夏妇幼保健院（宁夏儿童医院）检验科，银川 750004

关键词：Rho相关激酶, Y27632, 纺锤体, 卵泡培养, 实时定量聚合酶链反应, 小鼠

基金：放化疗过程中多途径女性生育力保存技术及应用研究

目的： 探讨Rho相关激酶（ROCK）抑制剂Y27632在小鼠腔前卵泡体外发育中的作用。：： 方法： 取出生12.5 d的小鼠卵巢，机械法收集单枚腔前卵泡，采用超低吸附96孔板模拟3D环境对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的实验组，通过形态学观察、卵泡直径的变化、成熟卵泡的数量、成熟卵母细胞纺锤体的变化等来评估卵泡的整体发育情况。采用Real-time PCR技术检测颗粒细胞中卵泡刺激素受体（FSHR）、卵母细胞中骨形态发生蛋白15（BMP15）、生长分化因子9（GDF9）等以及凋亡相关基因（Bad、Bax和Caspase-3）的表达情况，同时，用细胞存活染料检测卵泡发育过程中颗粒细胞的凋亡情况。：： 结果： ROCK抑制剂Y27632对卵泡直径增长和基本发育指标（存活数、成腔率和成熟率）无明显影响（P>0.05），但对照组卵母细胞成熟后纺锤体组装出现异常。培养8 d后，与对照组相比，实验组颗粒细胞特异性基因FSHR上调；卵母细胞特异性基因BMP15和GDF9上调，而叉头框O3（FoxO3)下调；凋亡基因Bax、Bad和Caspase3表达下调，实验组卵泡内的颗粒细胞凋亡明显少于对照组。：： 结论： 小鼠卵泡体外发育过程中，ROCK抑制剂Y27632能够抑制颗粒细胞的凋亡，防止卵母细胞纺锤体组装异常，进而提高卵泡体外发育质量。

来源：2021年第6期

《解剖学报》期刊编辑部

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