解剖学报

作者：雷蕾,陆铉,杨劲松,尤玉珍,梅燕

单位：1.武汉城市学院医学部，武汉 430083; 2.华中科技大学同济医学院附属协和医院血液内科，武汉 430022; 3.华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤科，武汉 430022；

关键词： 组蛋白去乙酰化酶抑制剂, 氧化应激反应, 缺氧/复氧, 流式细胞术

目的： 探讨组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）抑制剂（HDAC3I）RGFP966在PC12细胞缺氧/复氧（H/R)损伤中的作用。 ： 方法： 采用PC12细胞缺氧4 h复氧24 h培养建立H/R细胞损伤模型。H/R+抑制剂组采用RGFP966预处理1 h后进行H/R处理。实验分为3组，对照组、H/R组和H/R+抑制剂组，每组重复3次。采用MTT法测定细胞活性，比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)，流式细胞术分别检测细胞凋亡率和胞内活性氧簇（ROS），黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量，Western blotting法检测Bcl-2促凋亡基因(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、剪切型Caspase-3（cleaved-Caspase-3）和HDAC3蛋白表达。 ： 结果： 与对照组相比，H/R组与H/R+抑制剂组细胞活力均显著降低（P<0.05），细胞LDH（P<0.05）和凋亡率（P<0.05）均显著升高。H/R+抑制剂组与H/R组相比，H/R+抑制剂组细胞活力显著高于H/R组（P<0.05），而H/R+抑制剂组细胞LDH（P<0.05）和凋亡率显著低于H/R组（P<0.05）。此外，与对照组相比，H/R组与H/R+抑制剂组ROS和MDA（P<0.05）均显著增加，SOD显著降低（P<0.05）；H/R+抑制剂组与H/R组相比，H/R+抑制剂组ROS和MDA（P<0.05）显著低于H/R组，而SOD水平高于H/R组（P<0.05）；Western blotting结果表明，与对照组相比，H/R组与H/R+抑制剂组Bax、cleaved-Caspase-3均显著升高，Bcl-2显著降低（P<0.05），H/R+抑制剂组Bax、cleaved-Caspase-3均显著低于H/R组，Bcl-2显著高于H/R组（P<0.05）；与对照组相比，H/R组HDAC3蛋白表达显著升高（P<0.05），而H/R+抑制剂组HDAC3蛋白显著降低（P<0.05）。 ： 结论： HDAC3I通过减轻氧化应激降低缺氧/复氧引起的PC12细胞凋亡。

来源：2021年第5期

《解剖学报》期刊编辑部

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