解剖学报

作者：胥虹贝,罗勇

单位：1.重庆医科大学附属医院神经内科，重庆 400016; 2.贵州医科大学附属医院神经内科，贵阳 550004

关键词：氧糖剥夺/复氧, 髓样细胞激活受体2, 磷脂酰肌醇-3激酶, 蛋白激酶B, 核因子κB, 免疫印迹法, 小胶质细胞

基金：教育部“高等学校博士学科点专项科研”联合资助课题;重庆市卫生局中医药科研重点项目;重庆市卫生局中医药科研项目

目的 探讨TREM2调控氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型小鼠小胶质细胞向M2型极化的机制。： 方法： 体外培养N9小胶质细胞系，采用TREM2过表达慢病毒（LV-TREM2）转染N9细胞，空载病毒LV-scramble作为对照组，并建立OGD/R模型。将OGD/R细胞随机分为OGD/R组、OGD/R+LV-scramble组和OGD/R+LV-TREM2组。Real-time PCR检测TREM2 mRNA在OGD/R 组细胞复氧72 h内表达情况。免疫荧光染色观察慢病毒LV-scramble 和LV-TREM2在正常N9小胶质细胞内转染情况，Real-time PCR和Western blotting验证慢病毒转染效率，Real-time PCR和ELISA检测小胶质细胞M1型标志物肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）及M2型标志物精氨酸酶 1（Arg-1）和IL-10 mRNA 和蛋白表达情况。Western blotting检测磷酸化-磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、Akt、磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-ⅠκBα）和ⅠκBα蛋白含量，免疫荧光分析核因子κB P65（NF-κB P65）蛋白在细胞内分布情况。： 结果 复氧72 h内，OGD/R 组细胞TREM-2 mRNA含量明显增加，高峰位于24 h和48 h；慢病毒LV-TREM2可有效促进OGD/R组细胞TREM2 mRNA和蛋白表达（P<0.001，P<0.01）。与OGD/R组相比，OGD/R+LV-TREM2组TNF-α、IL-1β和iNOS mRNA和蛋白明显降低，而Arg-1和IL-10 mRNA和蛋白含量明显升高（P<0.05）；此外，OGD/R+LV-TREM-2组p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显升高（P<0.05），p-ⅠκBα/ⅠκBα比值显著下降（P<0.001），且NF-κB P65蛋白核转位明显被削弱。： 结论： TREM-2过表达可促进OGD/R 模型小胶质细胞向M2型转化从而发挥抗炎作用，该作用与TREM-2调控小胶质细胞PI3K/Akt和NF-κB信号通路有关。

来源：2021年第3期

《解剖学报》期刊编辑部

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