解剖学报

作者：孔吟皓,徐龙飞,王琪,韩晶,洪艳

单位：贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，贵阳 550004；

关键词：神经元素3, 脐带间充质干细胞, 胰岛素分泌细胞, 基因过表达, 实时定量聚合酶链反应, 人

基金：Ngn3基因修饰对脐源性胰岛素分泌细胞分化调控的影响

目的： 探讨神经元素3（Ngn3）的过表达能否促进人脐带间充质干细胞（HUCMSCs）向胰岛素分泌细胞（IPCs）的诱导分化。： 方法： 分离培养HUCMSCs，流式细胞术鉴定其表面分子表达，成脂细胞、成骨细胞诱导鉴定其多向分化潜能；分阶段诱导HUCMSCs分化为IPCs，该过程包括低糖诱导和高糖诱导两阶段共21 d；实验分为两组，对照组仅进行分阶段诱导，实验组在分阶段诱导第6天感染载有目的基因Ngn3的慢病毒过表达载体，感染完成后继续诱导；电子显微镜观察诱导前、后细胞结构变化；两组细胞诱导完成后收集mRNA和蛋白质，通过Real-time PCR和Western blotting法比较诱导后两组细胞的胰岛素和肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A（Mafa）表达情况；收集诱导中后期培养基上清液，ELISA测定C肽含量。：： 结果： 成功分离HUCMSCs，细胞阳性表达CD105、CD90，阴性表达CD34、CD45，具有成脂、成骨分化能力；通过分阶段诱导将HUCMSCs向IPCs诱导，细胞阳性表达Mafa和胰岛素；实验组在诱导过程中成功过表达Ngn3；电子显微镜观察显示，实验组诱导细胞结构更为成熟；实验组IPCs胰岛素和Mafa的表达量明显高于对照组；诱导过程中实验组细胞分泌的C肽量高于对照组。：： 结论： 慢病毒介导的Ngn3过表达提高了HUCMSCs向IPCs的诱导分化效率。

来源：2021年第3期

《解剖学报》期刊编辑部

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