解剖学报

作者：焦叶林,赵云岗,刘其伟,阮豪杰,高社干,齐义军

单位：1.河南科技大学医学院，临床医学院，第一附属医院，肿瘤医院;河南省肿瘤表观遗传重点实验室，河南 洛阳471003; 2.洛阳市第一人民医院病理科，河南 洛阳471003; 3.长治市妇幼保健院医学遗传科，山西 长治046011; 4. 许昌学院解剖学教研室，河南 许昌461000

关键词：甲醛固定, 石蜡包埋, 蛋白提取, 蛋白纯化, 免疫印迹法

目的： 探讨从甲醛固定石蜡包埋（FFPE）食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中高效率提取蛋白质的方法。： 方法： 6种裂解液和100 ℃、105 ℃两种条件分别提取8例甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白，Bradford法测定蛋白浓度、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、Western blotting和免疫组织化学评价各方法提取组织蛋白的效率和质量，不同蛋白沉淀方法纯化提取蛋白。： 结果： Laemmli裂解液（4号）100 ℃处理提取癌组织蛋白效率最高，Western blotting检测癌组织中14-3-3σ蛋白表达与免疫组织化学检测结果一致；2倍体积乙腈(含0.1%三氟乙酸)沉淀FFPE提取蛋白能够降低蛋白电泳背景。： 结论： Laemmli裂解液100 ℃处理可高效提取的甲醛固定石蜡包埋组织蛋白且适用于Western blotting检测蛋白标志物分子，乙腈蛋白沉淀法能够进一步去除残余的交联蛋白质分子。

来源：2021年第1期

《解剖学报》期刊编辑部

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