解剖学报

国内刊号:11-2228/R

国际刊号:0529-1356

解剖学报杂志2020年第6期:缺失第8外显子的SIRT1剪接体和SIRT1全长在293T细胞氧化损伤中的不同作用

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作者:杨小荣,高瑞君,李艳丽,殷丽天,张策

单位:山西医科大学生理学系,细胞生理学教育部重点实验室, 太原 030001;

关键词:过氧化氢, 氧化应激, 沉默信息调节因子1全长, 沉默信息调节因子1-ΔExon8, 流式细胞术

基金:国家自然科学基金项目;山西省自然科学基金项目;山西省‘1331工程’重点学科建设计划经费资助;山西省重点学科建设经费资助

目的 探讨缺失第8外显子的沉默信息调节因子1(SIRT1)剪接变异体(SIRT1-ΔExon8) 和SIRT1全长(SIRT1-FL)在氧化应激损伤中可能发挥的不同作用。::方法 在人胚肾293T细胞分别转染SIRT1-ΔExon8干扰质粒和SIRT1-FL过表达质粒,给予过氧化氢(H2O2)诱导氧化应激损伤模型,应用CCK-8检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法检测细胞的损伤程度,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧簇(ROS)水平,Real-time PCR法检测细胞SIRT1-ΔExon8和SIRT1-FL mRNA的水平。::结果 H2O2(50~800 μmol/L)可剂量依赖性地诱导细胞氧化应激损伤,包括细胞活力下降,LDH释放增加,细胞凋亡和胞内ROS含量增加,并引起SIRT1-FL mRNA水平降低和SIRT1-ΔExon8 mRNA表达增加;此外,过表达SIRT1-FL或干扰SIRT1-ΔExon8也可以部分抑制H2O2(400 μmol/L)引起的细胞氧化应激损伤。::结论 SIRT1-ΔExon8可能促进细胞的氧化应激损伤,而SIRT1-FL则发挥相反的作用。:

来源:2020年第6期

《解剖学报》期刊编辑部

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