解剖学报

作者：郭梦姚,孙琳,林旭,张文静,张静,吴靖芳,薛刚

单位：1.河北北方学院形态学实验室； 2.耳鼻咽喉头颈外科教研室，河北 张家口 075000；

关键词：三叶因子3, 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子κB, 甲状腺乳头癌, 慢病毒转染, 免疫印迹法, 流式细胞术, 实时定量聚合酶链反应, 人

基金：河北省自然科学基金;张家口市科技支撑项目;河北省教育厅青年基金项目;河北省卫生厅项目

目的 探讨三叶因子3（TFF3）对人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。：：方法 构建TFF3基因过表达和敲低表达的慢病毒表达载体，包装293T细胞，产生慢病毒颗粒，病毒液转染TPC-1细胞，构建稳定增强TFF3表达的TFF3-TPC-1细胞系以及增强对照组细胞系ConTFF3-TPC-1；构建抑制TFF3表达的shRNA-TFF3-TPC-1细胞系以及沉默对照组细胞系shCon-TPC-1；利用Western blotting实验与Real-time PCR验证TFF3过表达和沉默效率；生长曲线和集落形成实验检测4组细胞增殖状况；流式细胞术检测4组细胞凋亡情况；Western blotting和免疫细胞化学染色检测凋亡相关蛋白和磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）、核因子-κB (NF-κB)通路蛋白表达水平。：结果 1. 成功构建TFF3过表达和抑制表达稳转细胞系TFF3-TPC-1及细胞系shRNA-TFF3-TPC-1；2. TFF3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显高于ConTFF3-TPC-1组（P＜0.05或：P＜0.01），shRNA-TFF3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显低于shCon-TPC-1组（P＜0.01）；3. TFF3-TPC-1细胞凋亡率低于ConTFF3-TPC-1（0.75%±0.08% vs 5.62%±0.3%，P＜0.01），shRNA-TFF3-TPC-1凋亡率高于shCon TPC-1（22.2%±1.2 % vs 5.34%±0.4%，P＜0.01）； 4. 沉默TFF3基因后，Bax、细胞色素C（Cyt-C）、cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3表达升高，Bcl-2、通路蛋白Akt、p-Akt、NF-κB-P65表达降低（P＜0.05或 P＜0.01）。：结论 TFF3可能通过影响PI3K/Akt/NF-κB信号通路调节TPC-1细胞的增殖和凋亡。

来源：2020年第4期

《解剖学报》期刊编辑部

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