解剖学报

作者：方可欣,王昕晨,洪开听,竺王玉

单位：1. 浙江省舟山医院细胞分子生物学实验室，浙江 舟山 316012;2. 浙江省舟山市妇女儿童医院检验科，浙江 舟山 316000；

关键词：肺腺癌, RNA结合蛋白-5, H1299细胞系, 载体构建, 慢病毒感染, 实时定量聚合酶链反应

基金：浙江省自然科学基金项目;浙江省医药卫生科技计划;舟山市卫生局攻关项目

目的 探讨慢病毒载体介导RNA结合蛋白-5（QKI-5）对肺腺癌细胞凋亡的影响。：方法 应用GV358（过表达）和GV248（抑制表达）载体分别构建针对QKI-5基因的慢病毒过表达载体和抑制表达载体，转染293T细胞产生慢病毒颗粒，收集并测定慢病毒滴度。将经测序鉴定的QKI-5过表达的慢病毒或抑制表达的慢病毒转染到肺腺癌细胞H1299，Real-time PCR检测QKI-5 mRNA表达，集落形成实验检测H1299细胞增殖情况，膜联蛋白V（annexin V）、碘化丙啶（PI）检测H1299细胞凋亡情况，Western blotting检测促凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达。：结果 成功构建QKI-5过表达慢病毒载体和抑制表达慢病毒载体，与对照组比较，QKI-5过表达后，QKI-5 mRNA表达增加，细胞集落形成减少，肺腺癌细胞早期凋亡增加，促凋亡蛋白Caspase-8表达增加；QKI-5抑制表达后，QKI-5 mRNA表达降低，细胞集落形成增加，但肺腺癌细胞凋亡无明显变化，然而促凋亡蛋白Caspase-8表达减少。：结论 慢病毒介导 QKI-5抑制增殖，可能通过Caspase-8促进肺腺癌细胞系H1299的凋亡。

来源：2020年第1期

《解剖学报》期刊编辑部

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