解剖学报

作者：王世广,司旭艳,李晓婷,李登云,王丽君,王鹏

单位：1.郑州工业应用技术学院医学院医学机能教研室，河南 新郑 451150; 2.郑州工业应用技术学院临床基础教研室，河南 新郑 451150; 3.郑州大学护理学院基础教研室， 郑州 450052；

关键词：西达本胺, 柔红霉素, K562/ADM细胞, 乳腺癌易感蛋白l, 组蛋白2AX, 流式细胞术, 人

基金：国家自然科学基金资助项目;河南省高等学校重点科研项目;河南省高等学校重点科研项目;河南省卫生与计划生育委员会医学教育研究课题

目的 观察西达本胺（CDM）能否影响人慢性髓系白血病耐药株K562/ADM细胞对柔红霉素（DNR）的敏感性，并探讨其可能的分子机制。方法 体外常规培养K562细胞和K562/ADM细胞，给予不同剂量CDM和（或）DNR处理48 h后，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测CDM与DNR对K562和K562/ADM细胞的毒性作用，采用Chou-Talalay中效分析法对两药的联合效应进行评价，采用流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和凋亡，采用Western blotting方法检测组蛋白2AX（H2AX）、γH2AX（Ser139）、共济失调毛细血管扩张征突变基因（ATM）、p-ATM（Ser1981）、乳腺癌易感蛋白l（BRCA1）和p-BRCA1（Ser1524）的蛋白表达水平。 结果 DNR可剂量依赖性地抑制K562/ADM细胞活力（P<0.05），半数抑制浓度（IC50）为11.76 μmol/L，耐药倍数为18.09；CDM可协同增强DNR对K562/ADM细胞的抑制作用置信区间（CI）（CI<1），反转倍数为8.11；与对照组相比，DNR组细胞增殖率显著降低（P<0.05），G2/M期细胞比例和凋亡率明显升高（P<0.05），而无毒剂量的CDM可协同增强DNR引起的细胞增殖抑制、G2/M期阻滞和细胞凋亡（P<0.05）；耐药株K562/ADM细胞中ATM和BRCA1蛋白表达水平显著高于其亲代K562细胞（P<0.05）；DNR可上调K562/ADM细胞中H2AX、ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平（P<0.05）；CDM与DNR联用可使γH2AX蛋白水平进一步升高，但p-ATM和pBRCA1蛋白水平的变化则相反（P<0.05）。 结论 CMD可反转K562/ADM细胞对DNR的耐药性，这可能与上调H2AX蛋白的磷酸化水平以及下调ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平有关。

来源：2019年第6期

《解剖学报》期刊编辑部

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