解剖学报

作者：邱竹,姜蓉,汪子铃,陈粼波,陈雄斌,王璐,黄国宁,王亚平

单位：1. 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室，组织学与胚胎学教研室，重庆 400016;2. 重庆市妇幼保健院生殖与遗传研究所，重庆400013；

关键词：当归多糖, D-半乳糖, 睾丸保护, 氧化应激, 免疫印迹法, 衰老小鼠

基金：当归多糖调控Keap1-Nrf2-ARE抗氧化通路延缓造血干细胞衰老的机制研究

目的 探讨当归多糖（ASP）对D-半乳糖（D-Gal）所致衰老小鼠睾丸的保护作用与机制。 方法 C57BL/6 J雄性小鼠40只，随机分为对照组、ASP对照组、衰老模型组ASP衰老模型组，每组10只。衰老模型组：小鼠颈背部皮下注射D-Gal(120 mg/kg，qd×42)；对照组小鼠皮下注射等时与等量生理盐水；ASP对照组小鼠皮下注射等量生理盐水15 d，第16天开始腹腔注射ASP(140 mg/kg，qd×27)；ASP衰老模型组小鼠建立方法同衰老模型组小鼠，第16天开始腹腔注射ASP（同ASP对照组）。模型复制完成第2天，采集各组小鼠内眦静脉血测定血清睾酮水平；取睾丸测定脏器指数；石蜡切片，HE染色观察睾丸组织学形态；做冷冻睾丸组织切片，衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色观察睾丸组织细胞衰老情况；制备睾丸组织匀浆上清液，酶学法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性，2，2’-连氮基-双（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）法检测总抗氧化能力(T-AOC)，硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量；Western blotting检测衰老相关蛋白P53、P21表达水平。 结果 各组间睾丸湿重及睾丸器官指数无明显差异，但衰老模型组小鼠睾丸组织结构损伤明显，生精小管的细胞层数减少，生精细胞出现退变，睾丸间质细胞明显减少；血清睾酮水平显著降低；SA-β-Gal染色阳性细胞密度显著增加；睾丸组织匀浆中SOD活性及T-AOC显著降低，MDA含量显著升高；P53、P21蛋白表达显著升高。与衰老模型组比较，注射ASP干预衰老过程，睾丸组织学结构损伤明显减轻，生精细胞退变与睾丸间质细胞减少均不明显；血清睾酮水平降低不明显；SA-β-Gal染色阳性细胞密度减少；SOD活性和T-AOC增高，MDA含量降低；P53、P21蛋白表达显著降低。 结论 ASP具有拮抗致衰剂D-gal对睾丸的损伤作用，其机制可能与ASP抑制氧化应激损伤及抑制衰老相关基因表达有关。

来源：2019年第4期

《解剖学报》期刊编辑部

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