解剖学报

作者：梁盛英,王红梅,杨芬,孙钰椋,刘彦礼,杨君,林俊堂

单位：1.河南省医用组织再生重点实验室; 2.新乡医学院第一附属医院妇二科; 3.新乡医学院生命科学技术学院干细胞中心;4.新乡医学院生物医学工程学院, 河南 新乡 453003

关键词：子宫内膜异位症, 旁分泌作用, 黏附因子, 免疫荧光, 流式细胞术, 异位子宫内膜干细胞

基金：国家自然科学基金课题;新乡市科技重大专项;河南省神经损伤修复重点实验室开放课题;新乡医学院产学研项目;新乡医学院研究生科研创新支持计划资助项目

目的 建立子宫内膜异位症（内异症）患者异位病灶来源子宫内膜干细胞（EnSCs）的分离培养及鉴定方法，并对所分离细胞的生物学特性进行检测，为研究EnSCs在内异症发病机制中的潜在作用提供支持。 方法 收集临床内异症患者异位病灶内膜组织样本，机械剪碎后Ⅰ型胶原酶消化，分离获得异位EnSCs，常规培养传代（n=10）;免疫荧光检测细胞波形蛋白（vimentin）的表达（n=3）; MTT法检测细胞增殖活性（n=5）;成脂成骨诱导检测细胞多向分化潜能（n=3），流式细胞仪检测细胞表面标志物（n=3）;蛋白芯片检测细胞条件培养基中促血管再生因子及相关炎症因子的分泌（n=6），同时检测细胞表面相关黏附分子的表达（n=7）。 结果 成功从异位病灶中分离获得异位EnSCs，所分离细胞强阳性表达骨架蛋白vimentin，且细胞阳性表达间充质干细胞表面标志物CD29、CD73、CD90及CD105，阴性表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45；经成脂诱导分化后油红O染色可见明显脂滴，成骨诱导分化后茜素红染色可见明显钙结节；蛋白芯片检测结果表明，异位EnSCs能够分泌高浓度的促血管再生因子血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素(ANG)及血小板衍生生长因子 (PDGF)-AA，以及与促血管再生密切相关的炎症因子白细胞介素 (IL)-6、IL-8和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)，且细胞表面高表达活化白细胞黏附分子（ACLAM)和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）。 结论 本研究成功建立内异症患者异位病灶来源EnSCs的分离培养及鉴定方法；对其活性因子分泌的研究表明，异位EnSCs具有明显的促血管再生作用。上述实验结果肯定了内异症患者异位病灶中干细胞的存在，在支持内异症发病机制中“干细胞学说”的同时，为进一步围绕异位EnSCs开发潜在的内异症治疗靶点提供可能。

来源：2019年第4期

《解剖学报》期刊编辑部

查看解剖学报杂志2019年第4期