解剖学报

作者：卞晓翠,刘玉琴,杨振丽,冯海凉

单位：中国医学科学院基础医学研究所， 北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心，北京 100005

关键词：短串联重复序列分型, 交叉污染, 特性鉴定, 聚合酶链反应, 肿瘤细胞, 细胞培养, 人

基金：国家科技基础条件平台

目的 为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证，确认这些细胞系使用的可靠性。 方法 收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系，提取细胞的基因组DNA，PCR扩增其中的多个短串联重复序列（STRs）位点后进行毛细管电泳，分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹，然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对，通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染。对怀疑HeLa细胞污染的肿瘤细胞，检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型（HPV-18）病毒插入片段。对怀疑T细胞白血病细胞污染的，则检测T细胞的各种特性（表面标志），根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞。 结果 本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品。本中心建立的6株细胞系均STR正确。其他单位建立的细胞系中有8株系正确，有23（62.2%）株系认定为错误细胞，人宫颈癌细胞HeLa是主要污染源；另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞SiHa、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染。 结论 国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染，科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定，或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞。另外，建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证。

来源：2019年第2期

《解剖学报》期刊编辑部

查看解剖学报杂志2019年第2期