解剖学报

作者：陈萌杜超,田焕娜,王爱乐,夏晓晓

单位：1.承德医学院基础医学院电子显微镜室; 2.承德医学院基础医学院生物化学教研室; 3.承德医学院基础医学院基础医学研究所 4.承德市中医院ICU室； 5.承德医学院2016级临床本科，河北 承德 067000

关键词：脑缺血再灌注, 自噬, 热休克蛋白70, 微管相关蛋白轻链3, 免疫印迹法, 免疫荧光, 大鼠

基金：河北省自然科学青年基金项目;河北省卫生计生委项目;承德医学院大学生科研项目

目的 应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠，检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3) 蛋白的表达，观察其对神经元超微结构的影响。 方法 成年雄性SD大鼠60只，随机分成5组：假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR)，Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(Cys C2)、Cys C高浓度组(Cys C3)，每组12只。采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型，缺血2 h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(mNSS)。Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达；免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数；免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(NeuN)共染的阳性细胞平均吸光度值；透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化。 结果 与IR组相比，Cys C1、Cys C2组mNSS评分明显减少(P<0.05)，HSP70的表达较IR组明显升高(P<0.01)；而Cys C3组mNSS评分升高，与IR组差别无显著性 (P&gt;0.05)；Cys C3组HSP70的表达明显降低(P<0.01)；Cys C各浓度组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达有不同程度的升高(P<0.01)；LC3和NeuN共染阳性细胞平均吸光度逐渐增强(P<0.05)；透射电子显微镜结果显示，Cys C1、Cys C2组神经细胞的超微结构有所改善，而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重。 结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用。浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡。

来源：2019年第2期

《解剖学报》期刊编辑部

查看解剖学报杂志2019年第2期