解剖学报

作者：李俊桦,马永能,谷瑞彩,廖华

单位：1.南方医科大学基础医学院解剖学教研室，广东省医学生物力学重点实验室，广州 510515; 2.四川省绵阳市第三人民医院检验科，四川 绵阳 621002；

关键词：钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ, 免疫分子, C2C12细胞, shRNA转染, 实时定量聚合酶链反应, 免疫印迹法, 免疫荧光

基金：国家自然科学基金;国家重点研发计划

目的 探究敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ（CaMKⅣ）基因对炎性培养条件下C2C12细胞免疫分子表达的影响。 方法 采用慢病毒基因干扰技术敲减C2C12细胞的CaMKⅣ基因，以2%马血清将C2C12细胞分化成肌管，以干扰素-γ（IFN-γ）刺激C2C12细胞，采用Real-time PCR和Western blotting检测CaMKⅣ的表达，采用Western blotting和免疫荧光检测免疫分子主要组织相容性复合体（MHC） class Ⅰ(H-2Kb)、MHC class Ⅱ(H2-Ea)、Toll样受体3（TLR3）的表达，采用Real-time检测肌细胞分泌型促炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α、巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1α和单核细胞趋化因子（MCP）-1的基因表达。 结果 IFN-γ可诱导成肌干细胞以及分化肌管表达或上调表达免疫分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、TLR3，同时上调C2C12细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MIP-1α和MCP-1的基因表达量；敲减CaMKⅣ基因导致上述上调趋势被抑制。 结论 敲减CaMKⅣ基因可有效抑制IFN-γ诱导的免疫分子的表达，可能提示CaMKⅣ参与调节肌细胞的免疫学特性。

来源：2019年第2期

《解剖学报》期刊编辑部

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